jembio S1核酸酶說明書

jembio 末端脫氧核苷酸轉移酶 (TdT)說明書(shu)

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末端脫氧核苷酸轉移酶 (TdT)                 

末端脫氧核苷酸轉移酶 (TdT) 是一種不依賴模板的聚合酶，可催化將脫氧核糖核苷酸單磷酸從(cong) 三磷酸添加到 的 3' 羥基末端。 

描述：

•  底物是：單鏈、具有3'-羥基末端的雙鏈 和寡脫氧核苷酸引物(1)。

• 用於(yu) 使用核糖核苷酸 (2) 對 3'-末端進行特定標記。

• 用 [a-32P] 3'-脫氧核苷標記 片段的 3'-末端 (3)。

• 將脫氧核糖核苷酸的均聚物尾部添加到載體(ti) 或 c (4,5)。

單位定義(yi) ：一個(ge) 單位定義(yi) 為(wei) 在 37°C 下 1 小時內(nei) 將 1 nmol dAMP 從(cong) dATP 轉移到寡脫氧核糖核苷酸起始劑 p(dA)50 的 3'-OH 末端所需的酶量。 儲(chu) 存條件：-20°C 儲(chu) 存。 

儲(chu) 存緩衝(chong) 液：100 mM Tris-HCl（pH 7.2，22°C）、1 mM 二硫蘇糖醇和 50% (v/v) 甘油。 

檢測條件：40 mM 二甲胂酸鉀 (pH 7.2)、8 mM MgCl2、8.3 mM 磷酸鉀、0.33 mM ZnSO4、10 mg/ml 牛血清白蛋白、0.01 mM 寡脫氧核苷酸 p(dA)50 和 1 mM [a-³²P]在 60 µl 的反應體(ti) 積中，在 37oC 下反應 1 小時。 

質量控製：所有製劑都經過核酸內(nei) 切酶、核酸外切酶和非特異性 RNase 以及單鏈和雙鏈 DNase 活性的檢測。 

參考：1. Chang, LM 和 Bollum, FJ (1971) J. Biol。化學 246、909-916。2. Roychoudhury, R. 和 Kossel, H. (1971) Eur。J. 生物化學。22、310-320。3. Tu, CPD, 和 Cohen, SN (1980) Gene 10, 177-1834. Roychoudhury, R.、Jay, E. 和 Wu, R. (1976) Nucleic Acids Res。3, 863-877。5. Deng, G. 和 Wu, R. (1983) Methods Enzymol。100, 96-116。