jembio Klenow 片段， 聚合酶簡介

jembio Klenow 片段， 聚合酶簡介

Klenow Fragment

Klenow ，大腸杆菌 聚合酶 l 酶的大片段，保留聚合酶 l 的聚合酶和校對 3'->5' 外切核酸酶活性。
描述：缺乏 5'-核酸外切酶活性 (1)。超純重組酶。用於(yu) Sanger 雙脫氧測序 (2)。適用於(yu) 第二鏈 c 合成 (3)。用於(yu) 3'-末端標記和填充 5'-突出粘性末端 (4)。
單位定義(yi) ：一個(ge) 單位是在 37oC 下 30 分鍾內(nei) 將 10 nmoles 的總核苷酸摻入酸不溶形式所需的酶量。
儲(chu) 存條件：儲(chu) 存在 –20oC。
儲(chu) 存緩衝(chong) 液：50 mM 磷酸鉀 (pH 7.0)、0.25 mM 二硫蘇糖醇和 50% (v/v) 甘油。
測定條件：67 mM 磷酸鉀 (pH 7.4)、6.7 mM MgCl2、1 mM 二硫蘇糖醇、dCTP、dGTP、dTTP 和 [a-32P]dATP 各 0.033 mM，以及 4.5 µg 活化 。在 100 µl 反應體(ti) 積中，在 37oC 下孵育 30 分鍾。
質量控製：對所有製劑進行汙染核酸內(nei) 切酶和 5'-核酸外切酶活性檢測。通過 SDS 聚丙烯酰胺凝膠電泳判斷，典型的製劑純度大於(yu) 95%。